scarabgenomics CRM197說(shuō)明書(shū)

• 以經(jīng)濟(jì)的價(jià)格高純度CRM197 -金龜子的rCRM197是在我們的基因組清潔表達(dá)^® 大腸桿菌，通過(guò)刪除基因組> 20％，可實(shí)現(xiàn)完整的超潔凈的蛋白質(zhì)通過(guò)生物工程。由于幾乎所有Scarab的CRM197都完好無(wú)損，因此您的半抗原不會(huì)浪費(fèi)。
• 生物仿制藥天然CRM197 -的氨基酸序列，質(zhì)譜法，圓二色性，分析所有指示金龜子在我們的基因組清潔制成重組CRM197 ^®大腸桿菌相當(dāng)于CRM197。
• 共軛準(zhǔn)備 - Scarab的CRM197結(jié)合能力已通過(guò)定量功能測(cè)定證實(shí)
• 超低內(nèi)毒素 - Scarab的工程化清潔基因組^® 大腸桿菌具有簡(jiǎn)化的內(nèi)毒素，比標(biāo)準(zhǔn)表達(dá)菌株更容易去除。

背景

交叉反應(yīng)材料197（CRM197）是一種基因無(wú)毒形式的白喉毒素（DT）。CRM197中的單堿基變化（位置52處的谷氨酸至甘氨酸）使A鏈的ADP-核糖基化活性失效，減弱毒性^1,2。盡管CRM197是無(wú)毒的，但它在免疫學(xué)上與白喉毒素?zé)o法區(qū)分。CRM197作為多糖和半抗原的載體起作用，使其在許多結(jié)合疫苗中具有免疫原性。

圣甲蟲(chóng)基因組學(xué)CRM197是重組形式的清潔基因表達(dá)^® 大腸桿菌，我們的專(zhuān)有平臺(tái)。

SOURCE
清潔基因組^® 大腸桿菌中表達(dá)的重組CRM197

產(chǎn)品分子量： 58.4 kDa

數(shù)據(jù)

圖1：Scarab Genomics的CRM197非常純凈，并且在批次之間保持一致。每批Scarab的CRM197的五個(gè)重復(fù)在Bis-Tris 4-12％梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上運(yùn)行并用GelCode TM Blue染色，然后通過(guò)凝膠掃描評(píng)估純度。計(jì)算每批的平均純度并如下分配：圖A純度98.3％，圖B純度95.5％。

圖2：Scarab Genomics的CRM197純度高于其他商業(yè)來(lái)源。將來(lái)自每種來(lái)源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12％梯度SDS聚丙烯酰胺凝膠上電泳并用GelCode TM Blue染色。Scarab產(chǎn)品中幾乎不存在分解產(chǎn)物（表示為A和B帶）。一些泳道中的被涂污的背景是由于蛋白質(zhì)降解和宿主蛋白質(zhì)的，兩者在Scarab產(chǎn)品中都是小的。泳道1大小標(biāo)記，泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197，SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197，SG2，Lane 5供應(yīng)商F，泳道6供應(yīng)商M和泳道7供應(yīng)商L.

圖3：Scarab CRM197的LC MS肽圖譜證實(shí)它與原生CRM197具有生物學(xué)相似性。在Scarab的高純度CRM197上進(jìn)行氨基酸測(cè)序和質(zhì)譜（MS）。MS材料的廣泛生物信息學(xué)分析顯示沒(méi)有翻譯后修飾。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后接著納米液相色譜-MS / MS鑒定出非常高的蛋白質(zhì)覆蓋率（~97-98％）。Scarab CRM197上的電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）證實(shí)了預(yù)期的肽序列。沒(méi)有觀察到與報(bào)道的氨基酸組成和側(cè)鏈修飾的差異。

圖4：圣甲蟲(chóng)的CRM197結(jié)合有效。并非CRM197中的所有賴(lài)氨酸都暴露在蛋白質(zhì)表面上以進(jìn)行潛在的綴合。采用Solulink的ChromaLink™生物素結(jié)合測(cè)定（San Diego，CA），利用NHS酯反應(yīng)方案將生物素與伯胺結(jié)合，我們證實(shí)Scarab的CRM197上至少有10個(gè)位點(diǎn)可用于結(jié)合。這種光學(xué)定量（在354nm處的吸光度）功能測(cè)試證實(shí)，Scarab的CRM197上的賴(lài)氨酸可與半抗原結(jié)合，如天然CRM197。

產(chǎn)品規(guī)格

質(zhì)量控制

等級(jí)： CRM197僅供研究使用，不適用于人類(lèi)或診斷代理。

儲(chǔ)藏條件：

• CRM197是0.2μm過(guò)濾的4mg / mL CRM197,150mM NaCl，25mM HEPES，pH7.4的冷凍溶液。收到后儲(chǔ)存在-70°C。
• 為了使聚集小化，將CRM197在37°C水浴中解凍1小時(shí)。
• 重復(fù)的凍融循環(huán)會(huì)降解材料。為了大限度地減少凍融循環(huán)，將CRM197等分以匹配所需的用途。
• 輕輕處理產(chǎn)品，不要VORTEX。

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