haemtech Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì)，以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì)，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化，蛋白質(zhì)修飾，化驗(yàn)開發(fā)，合同制造和合同研究。
haemtech HCVWF-0190說明書
血管性血友病因子
的多聚體結(jié)構(gòu)說明了具有結(jié)合因子VIII的1.8MDa von Willebrand因子（vWF）多聚體的形成。每個(gè)vWF單體（Mr = 260,000）在分子的NH2末端附近含有因子VIII結(jié)合位點(diǎn)。單體通過二硫鍵端對端地連接（NH 2至NH 2和COOH至COOH）以形成大的多聚體。成熟的多聚體可以每個(gè)單體亞基結(jié)合一個(gè)因子VIII分子。
HCVWF-0190 Human von Willebrand Factor
Size | 100 µg |
Formulation | 25 mM NaCitrate, 100 mM NaCl, 100 mM Glycine, pH 6.8 |
Storage | -80°C |
Purity | >95% by SDS-PAGE |
Activity Determination | N/A |
Shelf Life (properly stored) | 12 months |
HCVWF-0191 Human von Willebrand Factor - VIII "Free"
Size | 100 µg |
Formulation | 25 mM NaCitrate, 100 mM NaCl, 100 mM Glycine, pH 6.8 |
Storage | -80°C |
Purity | >95% by SDS-PAGE |
Activity Determination | N/A |
Shelf Life (properly stored) | 12 months |
血管性血友病因子（vWF）是一種多聚體血漿糖蛋白，是正常止血血小板栓塞形成所需的（1-8）。成熟的血漿蛋白由明顯相同的亞基（Mr = 260,000）組成，它們通過二硫鍵結(jié)合在一起。循環(huán)的vWF分子的大小范圍從二聚體（Mr = 520,000）到極大的多聚體（Mr> 10,000,000）。在正常止血期間，較大的vWF多聚體負(fù)責(zé)通過在血小板內(nèi)糖蛋白IB和內(nèi)皮下的暴露膠原之間形成橋接來促進(jìn)血小板栓的形成（9-14）。缺乏vWF蛋白或存在導(dǎo)致聚合減少的異?？赡軐?dǎo)致生物活性喪失，這是馮維勒布蘭德氏病的特征。
除了其在血小板栓塞形成中的作用外，vWF還負(fù)責(zé)血漿中因子VIII（抗血友病因子）的結(jié)合和轉(zhuǎn)運(yùn)（15）。似乎后一事件是功能性因子VIII的穩(wěn)定性和有效遞送的原因。研究表明，因子VIII與成熟vWF亞基的NH2末端部分結(jié)合，每個(gè)vWF單體具有一個(gè)因子VIII分子的化學(xué)計(jì)量（16,17）。
單鏈vWF單體在NH 2 - 末端和COOH - 末端都含有大量半胱氨酸殘基，其參與多聚體形成。碳水化合物分析表明，近15％的vWF質(zhì)量是由碳水化合物貢獻(xiàn)的（18）。似乎碳水化合物用于保護(hù)vWF免于蛋白水解，但對于功能活性或多聚體形成不是必需的。
使用Thorell（19）和Lollar（20）描述的方法的組合，從檸檬酸鹽人血漿制備vWF。還可獲得因子VIII“游離”vWF制劑，其進(jìn)一步純化以確保去除因子VIII促凝血活性（仍存在抗原）。通過在還原條件下的SDS-PAGE判斷，制劑純度> 95％，并且通過SDS /瓊脂糖凝膠中的電泳測定由大的多聚體組成。將蛋白質(zhì)在0.025M檸檬酸鈉，0.1M甘氨酸，0.1M NaCl，pH6.8中冷凍運(yùn)輸，在-70℃下儲存。
凝膠 | Novex 4-12％Bis-Tris | ||
加載 | 人類血管性血友病因子，每泳道1微克 | ||
緩沖 | MOPS | ||
標(biāo)準(zhǔn) | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的） | ||
本地化/次> | 血漿和內(nèi)皮下 | ||
行動方式 | 通過在內(nèi)皮下形成血小板糖蛋白IB和暴露的膠原之間的橋接來促進(jìn)血小板栓的形成; 也綁定和運(yùn)輸因子VIII | ||
分子量 | 260,000到> 10,000,000（1-8） | ||
等電點(diǎn) | 5.7-5.9（21） | ||
消光系數(shù) | 不適用; 通過總蛋白質(zhì)測定確定濃度。 | ||
血漿濃度 | 10微克/毫升（21） | ||
結(jié)構(gòu)體 | 由相同的260,000個(gè)分子量亞基組成的多聚體蛋白質(zhì) | ||
碳水化合物百分比 | 約15％（18） | ||
參考
出版物
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